重組IgG制備

隨著(zhù)重組蛋白技術(shù)的進(jìn)一步完善，真核哺乳動(dòng)物細胞蛋白表達系統憑著(zhù)蛋白折疊和完善的翻譯后休息系統，表達的抗體更接近天然構象，從而具有和天然抗體相同的生物活性，因此常用于功能蛋白、抗體及臨床疫苗的生產(chǎn)。艾柏森生物提供工業(yè)級別重組IgG、Fab和ScFv等抗體片段的制備和純化服務(wù)。

瞬時(shí)轉染表達

瞬時(shí)轉染（transienttransfection）是將重組抗體基因導入真核細胞的方式之一。在瞬時(shí)轉染中，重組DNA導入感染性強的細胞系以獲得目的基因暫時(shí)但高水平的表達。轉染的DNA不必整合到宿主染色體，可在比穩定轉染較短時(shí)間內收獲轉染的細胞，并對溶解產(chǎn)物中目的基因的表達進(jìn)行檢測。艾柏森提供從基因優(yōu)化、載體構建、瞬轉HEK293細胞/CHO細胞、表達純化小試以及大規模發(fā)酵服務(wù)?？梢远虝r(shí)間內生產(chǎn)mg至g級重組IgG。

構建穩定細胞系

構建目的基因的表達質(zhì)粒后，可通過(guò)電轉、慢病毒轉染等方法，將質(zhì)粒轉染至宿主細胞。選用DHFR /GS基因表達系統,將轉染的細胞培養在合適的選擇性培養基中，然后進(jìn)行MTX/MSX壓力篩選,以產(chǎn)生穩定細胞庫。

艾柏森生物使用MolecularClonePix2系統,高通量、自動(dòng)化的篩選出100-200個(gè)高水平分泌克隆，并從中挑選10-20個(gè)高產(chǎn)克隆，進(jìn)行下一步的穩定性測試。我們挑選出10個(gè)克隆，進(jìn)行10次傳代后，qPCR和WB法檢測細胞株的穩定性。我們提供序列及載體報告, 3株表達的細胞株，表達分析、穩定性測試報告以及詳細的穩定細胞株構建報告。

IgG構建服務(wù)簡(jiǎn)介

VL和VH基因片段的密碼子優(yōu)化和基因合成

表1 噬菌體展示技術(shù)服務(wù)項目：IgG的重組表達生產(chǎn)